B) Extraction de la capsaïcine

Expérience :

Nous avons réalisé une expérience pour mettre en évidence la présence de capsaïcine dans le piment. Notre expérience est une chromatographie sur couche mince mais pour pouvoir la réaliser nous avons d'abord fait une décantation.

Matériel :

- blouse, lunettes, gants 

- 1 mortier avec pilon

- 1 papier filtre

- 1 entonnoir Büchner 

- béchers

- parafilm

- ampoule à décanter

- eau distillée

- sel

- piments

- éthanol

- dichlorométhane

- agitateur magnétique

- cure dents

- baume du tigre

- lampe UV

- plaque de silice

Le solvant le plus efficace pour réaliser la manipulation est l'éther mais étant interdit à la vente nous donc utilisé de l'éthanol dénaturé à 95°C. 

La vente de capsaïcine pure étant interdite à la vente à cause de sa dangerosité, nous avons utilisé du baume du tigre car il contient de la capsaïcine. Il nous servira de produit de référence pour prouver la présence de capsaïcine.

Protocole expérimental :

• Broyer les piments à l'aide du mortier.
• Introduire de l'éthanol au fur et à mesure.
• Agiter le tout à l'aide d'un agitateur magnétique.
• Mettre la solution obtenue dans un bécher et recouvrir de parafilm.
• Laisser reposer pendant 15 jours.

• Filtrer le contenu du bécher à l'aide de l'entonnoir Büchner et du papier filtre pour ne garder que le liquide mélangé avec l'éthanol pour pouvoir effectuer la décantation.

• Introduire la solution (liquide mélangé à de l'éthanol) dans une ampoule à décanter.

Puisque notre solution contient encore du béta carotène (colorant) mais que nous ne voulons pas cette molécule très miscible* avec l'eau contrairement à la capsaïcine nous avons ajouté de l'eau salée pour obtenir deux phases bien distinctes. De plus, l'eau salée ayant une densité plus forte que l'eau normale la séparation se fera plus facilement.

• Ajouter donc de l'eau salée dans l'ampoule à décanter pour pouvoir séparer la phase aqueuse (eau salée + béta carotène) de la phase organique (éthanol + capsaïcine).
• Boucher puis agiter l'ampoule. Dégazer régulièrement.

• Poser l'ampoule sur son support et enlever le bouchon pour effectuer le relargage.
• Récupérer la phase organique pour pouvoir effectuer la chromatographie sur couche mince.

Malheureusement toutes nos tentatives de séparation ont échoué car aucune des deux phases n'étaient visibles. Nous avons quand même décidé de réaliser la chromatographie malgré la présence de béta carotène dans la solution. 

• Faire un dépôt de la solution obtenue précédemment sur la plaque de silice et faire de même avec du baume de tigre.

• Sur l'image ci-dessus, la solution se trouve à gauche et le baume du tigre à droite.
• Poser la plaque de silice dans un bécher contenant l'éluant (dichlorométhane).

Nous avons choisi le dichlorométhane comme éluant car c'est celui qui fonctionne le mieux. Mais cela fonctionne aussi avec le cyclohexane, l'acétone mélangés ou l'eau + l'éthanol.

• Sécher la plaque avec un sèche-cheveux.
• Placer la plaque sous une lampe à UV pour obtenir les résultats.

Nous pouvons voir sur les deux taches que la capsaïcine est montée.

Notre expérience nous a permis de prouver la présence de la molécule de capsaïcine dans les piments.